MODÉLISATION DE LA NICHE LEUCÉMIQUE (LAM)

Développement préclinique

Thérapie ciblée
Chimiothérapie

Recherche préclinique (TRL 4-5)

Modèle de niche tissulaire par co-culture en physioxie (concentration physiologique d’oxygène) pour la sélection et la validation de candidats médicaments pour le traitement de la leucémie aiguë myéloïde (LAM).

La plateforme de culture cellulaire CellOxia propose des équipements (XVivo Biosphérix) permettant de réaliser des études en conditions atmosphériques contrôlées, pour reproduire in vitro et ex vivo les paramètres physiologiques ou physiopathologiques existant au sein de la niche tissulaire comme est le cas pour la moelle osseuse leucémique.

Description

Périmètre des activités de recherche

Recherche préclinique utilisant un modèle in vitro et ex vivo de niche leucémique pour la sélection et la validation de nouvelles molécules pour le traitement des LAM :

Criblage

Démonstration du mécanisme d'action
Evaluation d'efficacité
Validation in vivo en PDX AML

Conduite des études

Les étapes :

Conception de l’étude après définition de la question posée et des services demandés.
Proposition d’un cahier des charges en fonction du service requis (prestation ou utilisation simple des équipements).
Mise en place des services et des expérimentations.
Conduites des expérimentations et analyses des résultats
Rendu d’un rapport d’étude pour les prestations ou accompagnement des expérimentateurs

Infrastructure de recherche

Plateformes expérimentales et d'analyse :

XVivo modèle X1 (Biosphérix)
Laboratoire de culture P2
Système d’imagerie cellulaire intelligent PAULA (Leica)
Microscope inversé Nikon Ti avec imagerie contraste de phase et fluorescence Modèles cellulaires :
Cellules primaires de patients LAM (blastes leucémiques)
Cellules mésenchymateuses ou adipocytaires
Lignées humaines de LAM et cellules stromales humaines et murines

Personnels techniques :

Ingénieur spécialisé pour le design et la réalisation des études en hypoxie

Assurance qualité

La plateforme CellOxia fait partie de L’UAR CNRS 3427/US005 Inserm comprenant 11 plateformes. Créée en 2016 et labellisée par le Siric Brio elle a intégré l’UAR en 2021. Elle a à ce jour 12 laboratoires académiques et deux entreprises qui ont ou utilisent toujours ses services et ses équipements.

Spécifications

La plateforme

Ensemble de tests in vitro, reproduisant les conditions physiopathologiques de la niche leucémique, pour la sélection et la validation de candidats médicaments pour le traitement de la LAM.

Les études

Criblage de candidats médicaments :

Test de prolifération et d’apoptose +/- drogues en hypoxie
Dose-réponse d’agents à différentes concentrations en oxygène
Criblage de molécules

Evaluation de l'activité anti-leucémique des candidats médicaments :

Test in vitro (lignées), ex vivo (cellules primaires) ou in vivo (xenogreffe avec suivi de réponse et de survie)

Mécanisme d'action de l'activité anti-leucémique du candidat :

Analyse du signaling et des points clés par les techniques adaptées (Western-blot, cytométrie, PCR-Q, RNASeq)
Modélisation par génération de lignées cellulaires modifiées

Exemples de partenariats

Recherche des gènes de résistance au Giltéritinib dans les LAM - Afin d’identifier les gènes impliqués dans les résistances au Giltritinib, un criblage pan génomique CrispR a été utilisé dans les conditions de la niche (coculture et 3% oxygènes).

Partenaire : Astellas Pharmaceutical

Recherche des gènes de résistance aux combinaison thérapeutiques dans les LAM - Afin d’identifier les gènes impliqués dans les résistances aux différentes combinaisons utilisées à ce jour dans les LAM (Ara-C, (-aza, Giltéritinib, vénétoclax), un criblage pan génomique CrispR a été utilisé dans les conditions de la niche (coculture et 3% oxygènes) avec ces agents seuls ou en combinaison.

Partenaire : Bristol Meyrs Squibb