ÉVALUATION IN VITRO DES EFFETS DES MÉDICAMENTS ANTILEUCÉMIQUES DANS UNE NICHE LEUCÉMIQUE MODÉLISÉE AVEC MICROENVIRONNEMENT MÉDULLAIRE OPTIMISÉ (MSCS, HYPOXIE, PRESSION) (NMP/LAL/LAM/SMD)

Développement préclinique

Thérapie ciblée
Médecine de précision
Chimiothérapie

Recherche préclinique (TRL 4-5)

Modèles in vitro pour l'évaluation de l'impact fonctionnel de médicaments antileucémiques dans une niche leucémique modélisée avec microenvironnement médullaire optimisé (cellules stromales mésenchymateuses, hypoxie, pression intra-médullaire).

Ces modèles permettent d’évaluer l’impact de candidats médicaments sur les cellules leucémiques au sein de la moelle osseuse, notamment en ce qui concerne le métabolisme oxydatif et énergétique de la niche en rapport avec la chimiorésistance et la pharmaco-modulation.

Description

Périmètre des activités de recherche

Recherche préclinique utilisant différents modèles in vitro pour tester l'action de médicaments métaboliques sur la niche médullaire :

Evaluation de la toxicité

Conduite des études

Les étapes :

Analyse de la stratégie de développement de produit innovant
Conception de l’étude en fonction des données scientifiques et des hypothèses mécanistiques
Rédaction des plans d’étude
Analyse et communication des résultats

Infrastructure de recherche

Plateformes expérimentales et d'analyse :

Stations de modélisation de l'hypoxie et de la pression intra-médullaire (Avatar®)
Cytométrie de flux : FACS (BD Melody®)
Analyses métaboliques en temps réel (Seahorse®, Omnilog®)
Irradiateur de petits animaux (Faxitron®)
Systèmes d'analyse en single cell (dont Chromium Controller 10X Genomics)
Analyses génomiques, transcriptomiques, métabolomiques, lipidomiques

Modèles :

Modèles de niche tumoral avec MSC primaires et lignées (MS5, HS27a, HS5)
Cellules primaires de patients
Lignées cellulaires leucémiques (plus de 20 disponibles)
Leucémies murines (FLA2, FLB1)

Personnels techniques :

4 ingénieurs PhD
3 techniciens

Spécifications

La plateforme

Ensemble d'études précliniques utilisant des modèles leucémiques in vitro pour l'évaluation fonctionnelle de l'impact de médicaments métaboliques sur l'environnement tumoral.

Les études

Evaluation de la toxicité du candidat médicament :

Analyses du cycle cellulaire, de l’apoptose, des cassures de l’ADN
Analyses du métabolisme oxydatif (quantification des ROS par CMF, antioxydogrammes, voie NRF2, signalisation MAPK) et énergétique (glycolyse, phosphorylation oxydative)
Analyses transcriptomiques (RNAseq, scRNAseq, RT-qPCR), génomiques (profils mutationnels par NGS) et épigénomiques (méthylation ADN)
Analyses fonctionnelles (cultures de progéniteurs hématopoïétiques, LTC-IC en dilution limites, différenciation des MSCs).
Modèles murins de leucémies de cellules souches (leucémies FLA2 & FLB1 / Cf. Herault O et al, J Exp Med 2012, 209:895-901)